龋病的治疗方法通常分为非手术性措施和手术性措施。

由于臭氧是一种极强的氧化剂，能与多种有机和无机成分发生作用，长期以来作为一种消毒杀菌剂。近几年来，臭氧引起口腔学者的注意，被作为一种有效杀菌剂引入到龋病的早期非手术治疗中。

龋病的治疗方法 治疗应用阶段 具体措施
非手术性措施 龋的早期阶段 口腔卫生方法(如刷牙、牙线、牙签等)、饮食控制、氟化物的使用、窝沟封闭
手术性措施 中到深龋阶段 应用手术性措施去除龋坏组织并进行充填

一、臭氧治疗龋病的作用机理及特点
1.杀菌作用

臭氧的灭菌效果发生在各个方面，几乎对所有细菌、病毒、霉菌、真菌及原虫、卵囊都具有明显的灭活效果，且灭菌迅速，是紫外线的300～600倍，是氯的3125倍。臭氧对引起龋病的各种相关细菌也有极强的杀灭作用。Nagayoshi的体外研究发现：0.5mg/l的臭氧水作用10s后，变链降低到58%，当臭氧水浓度上升到2mg/l，变链被即刻杀灭。其他的口腔相关菌如远缘链球菌、血链、唾液链球菌也有类似的结果。同样浓度的臭氧水对G-的牙龈卟啉单胞菌、牙髓卟啉菌、伴放线放线杆菌也有明显的杀灭作用。在取样的菌斑生物膜中，4mg/l的臭氧水对变链作用120s有完全的杀灭效果，同2.3mg/ml的聚维酮碘( povidone iodine )效果相似，好于40μg/ml的苄索氯铵( benzethonium chloride)。虽然菌斑生物膜的存在，提高了细菌对杀菌剂的耐受能力，但研究结果显示：对拔出的根龋用healozone臭氧发生器产生臭氧作用10s，能消灭根龋中99%的微生物；作用20s后，能消灭根龋中99.9%的微生物。这种极度快速的杀菌能力是口腔治疗效果的基础。

下面来了解一下影响臭氧杀菌效果的因素吧~




臭氧杀菌的效果主要受其浓度、微生物种类、作用时间、温度等因素影响。

① 臭氧对各种微生物杀灭效果不同。在纯培养中，相对于G+的白色念珠球菌和链球菌，G-的牙龈卟啉单胞菌、牙髓卟啉菌对臭氧的作用更敏感。微生物细胞膜的结构不同导致了对臭氧的敏感性不同。

② 温度、湿度也影响臭氧的杀菌效果。通常，温度低、湿度大杀菌效果好。实验证明当环境相对湿度小于45%，臭氧对空气中的悬浮物几乎没有杀灭性，在同样温度下，相对湿度超过60%时，杀灭效果逐渐增强，在相对湿度为90%时，达到最佳灭菌效果。

③ 臭氧的浓度也影响其灭菌能力，浓度在0.2mg/l以下，几乎没有杀灭作用。

④ 有机物的存在降低臭氧的杀菌能力。

据Baysan体内研究报道，尽管臭氧对各种严重程度的根龋中的微生物都有显著性杀灭效果，但仍表现出与临床的龋坏情况及臭氧的剂量有关。在洞形较浅(r=0.39 )、洞较小(r=0.34 )、或者未成洞、以及不太严重的病损中(r=0.48)，细菌的减少量更明显。作者分析可能与以下几个因素有关。在较严重的病损中，原有的微生物总量更多，有更多脱矿的牙本质与更多的有机成分，从而分散臭氧的作用。而龋损越靠近龈缘，微生物的降低量也越少(r=0.36 )。据分析可能越活跃的龋损越靠近龈缘，并且含有的有机质更多。然而，当臭氧使用20s后，就看不出臭氧与临床严重情况的相关性。因为当作用时间延长到20s，臭氧杀灭了各种情况下根面龋中绝大部分的微生物，86%的龋损中微生物含量达不到可检测的水平。

臭氧的杀菌机理一定要清楚了解！




臭氧的杀菌机理：

①臭氧很容易同细菌的细胞膜中的不饱和脂肪酸结合，通过打断分离c=c键氧化破坏细胞膜，穿入菌体内部，作用于脂蛋白和脂多糖，改变细胞的通透性，细胞内物质外流，使其失去活性，从而导致细菌溶解和死亡。

②破坏细胞内遗传物质，直接氧化细胞内的RNA、DNA，也可氧化细菌的葡萄糖氧化酶、脱氢氧化酶，导致细菌的物质氧化过程的破坏，从而破坏细菌的生长代谢，造成细胞死亡。

2.对龋病相关生物分子的氧化作用

臭氧能氧化攻击为数众多的生物分子，例如蛋白质、细菌代谢产生的酸，这些生物分子形成了龋病发展的适宜环境，在脱矿过程中起关键作用。其中主要为甲酸和丙酮酸，它们能促进pH值下降，抑制矿物质沉积。Silwood等用臭氧处理10s后，通过核磁共振对菌斑、唾液和根龋中的生物分子进行生化分析，结果证实它们被臭氧所氧化。臭氧将丙酮酸氧化脱羟基成为乙酸和二氧化碳，pH值上升，改变局部的生态环境。

臭氧能氧化各种蛋白质、氨基酸，如蛋氨酸、半肤氨酸、组氨酸和酪氨酸，裂解氨基酸之间的化学链。有学者报道，牙本质中主要的非胶原蛋白一可溶性磷蛋白是阻碍再矿化的因子，Clarkson提出去除这些蛋白质能提高再矿化的能力。研究报道次氯酸钠能氧化蛋白质，促进再矿化，臭氧作为比次氯酸钠更强的氧化剂更能去除这些蛋白质，使牙本质通道得以开放，使钙、磷、氟离子能深入到病损深部，形成再矿化。

3.后期作用

一旦以上的杀菌和生物分子的氧化作用存在，将有利于内源性或外源性的矿物质沉积，使平衡向再矿化方向转化。作为一种非直接性的后期作用，再矿化成为可能。在臭氧治疗后立即用电阻抗龋病监测仪(electric caries monitor, ECM)检测，由于矿物质的沉积需要一定时间，ECM最初读数没有显著性改变。在第1个月，ECM读数平均上升0.02，第12个月平均上升0.62。

二、口腔治疗中的臭氧发生器及其安全性
1.臭氧发生器Healozone

Healozone

当臭氧浓度及接触时间超过一定程度会刺激呼吸系统，严重时会造成生命危害。臭氧作为一种药物治疗方法，同其他药物一样，只有在正确的剂量和使用方法时才是有效和安全的。

从1999年臭氧开始引入到牙科治疗中，2003年5月德国Kavo公司正式推出用于口腔中的臭氧发生器Healozone，其后开始在欧洲得到应用，到2005年通过了FDA的认可，开始在美国得到应用。这是目前唯一获得了CE的许可在口腔内治疗龋病的臭氧设备。该仪器是一个自限的便携式臭氧气体产生装置，不会对患者和操作者造成伤害。其采用电晕放电法以空气为原料生产臭氧气体，主要组成部分包括：空气干燥器、压力流量计、臭氧发生器、运送臭氧到牙面的手机头、臭氧中和剂及真空泵。

Healozne采用以下方法来保障臭氧产生的浓度和安全性。1.空气干燥器含氯化钻，确保空气湿度的稳定。2.压力流量计能感受系统是否完全处于密封状态，如果有泄漏则立即停止激活臭氧发生器。3.真空泵确保系统内的低压以防止泄漏臭氧。4.工作机头与一次性的硅树脂杯相连。树脂杯有大小不同的尺寸，用以密闭不同大小的牙面。5.除湿器防止潮湿空气污染臭氧中和剂。6.臭氧中和剂二氧化镁降解O3为O2，并将中性的空气释放入环境中。

臭氧治疗后使用使用配套的再矿化液溶液，含2%氟化钠。

2.安全性研究

通过使用臭氧分析仪(Enviro Technology ，UK)定量检测体内研究中臭氧浓度(ppm ) 。随机选择8名用healozone进行了根面龋治疗的患者，在室温下应用臭氧10s(23℃)，在使用过程当中和过程之后，臭氧分析器的探头尖端被放置于杯罩边缘2mm内进行检测，研究中探测到的最大臭氧水平( ppm)远低于臭氧协会制定的安全浓度水平。

为改变现有治疗模式，应将臭氧治疗早期龋病所具有的优势尽早在临床上使用并体现。




三、臭氧治疗的特点
1.杀菌效果强、迅速、无毒、对环境无污染

臭氧比其他水溶性消毒液渗透性强。水溶液的表面张力妨碍了水溶性消毒液渗透进入细微的结构，例如牙本质小管中。洗必泰分子比臭氧分子大将近150%，这意味着CHX分子不能到达这些感染区域，或者需要更长的时间。臭氧的反应速度快。臭氧不到2秒钟即可通过破坏细胞膜来杀灭细菌，而洗必泰需要30分钟才能达到杀菌效果。临床上为了尽可能缩短这些液体消毒剂应用时间，以及考虑到口腔中环境湿度会进一步稀释液体物质，往往以非常高的浓度来应用，这就导致无关的细胞被无意中杀死。

臭氧没有其他药物的局限。例如洗必泰等，会产生全身性作用，提高微生物的耐药性及其他作用如舌染色、牙结石增多、以及感觉异常等。Healozone使臭氧能局部应用在龋坏牙面，而不会造成口腔内菌群失调。

2.改变治疗模式，促进自然愈合

目前的早期诊断技术已得到极大的发展，例如激光荧光技术、电阻抗法、光导纤维透照法等可以发现早期病变。尽管如此，目前的龋病治疗方法与中世纪时纯机械的方法没有很大的不同。为了治疗龋病，必须将感染的牙体组织去净。这种牙体外科的方法，或多或少会磨去了部分健康的牙体组织。即便如此，修复体下仍有可能遗留致龋微生物。据报道，微生物可能在修复体下方存活两年以上，增加继发龋出现的可能。

臭氧治疗使这种“钻磨牙体再进行充填”的模式发生改变。对于早期龋坏，臭氧治疗能杀灭致龋微生物及其相关代谢产物，使局部的环境发生改变，允许病损再矿化从而达到自愈；并且再矿化的牙体组织抗龋能力增强，这是臭氧治疗的非常重要的长期效果。

当龋洞形成，可以结合ART的方法，仅需先去除完全软化的牙本质，再用臭氧杀菌治疗后进行充填，从而最大限度地保留牙体组织，同时降低继发症状的出现。

四、Healozone在临床中的相关研究
1.原发性根面龋的研究

Healozone应用于原发性根面龋的主要研究见表1

2.恒牙窝沟龋的研究

Abu-Naba’a用prophyflex-2清洁牙面后，臭氧治疗90人共258个未成洞窝沟龋10s，随访观察12个月，其间共治疗4次，分别为第1、3、6、9月。结果显示，1个月后即能通过ECM读数检测出再矿化。12个月后试验组ECM读数改变为0.62，对照组为-0.27，差异有显著性，反应出试验组电阻抗值增加。有一些研究仅使用一次臭氧治疗40s，随访6个月后，也观察到DIAGNOdent读数和CSI读数下降。Cronshaw每3个月一次，使用臭氧治疗30s, 6个月后80%的DIAGNodent读数下降，19%保持不变，平均降低了49% ( p<0.05 )，CSI指数有80%下降。对照组临床指标没有改变，DIAGNodent读数继续升高。

3.乳牙牙合面龋的研究

Abu-Salem对16例42颗乳牙早期牙合面龋臭氧治疗10s后立即检测，DIAGNOdent读数下降，ECM无显著性改变。6个月后复查，两个读数都显示有显著性改变。12个月后复查时，CSI指数在治疗组降低，对照组升高。治疗组ECM值因再矿化而升高，对照组因脱矿继续降低。

4.其他相关研究

Baysan研究表明，臭氧治疗后有利于根面龋充填材料的保留。治疗组的根面龋用臭氧治疗后进行封闭，对照组只进行封闭治疗。12个月后，实验组61%的封闭材料完整，对照组仅有26.1%封闭完整< p<0.05 )。

Holmes对臭氧治疗后的术后反应与传统的钻磨和充填方式进行比较。对根面龋进行臭氧治疗40s后，用玻璃离子充填，3个月后用复合树脂更换。对照组磨去龋坏组织后用复合树脂充填。6个月后试验组没有一例发生敏感现象，而对照组有17.1%的病人出现敏感现象。

五、结论
目前臭氧在治疗龋病方面的应用引起了人们的兴趣。现有的研究部分证实臭氧对乳牙早期窝沟龋、恒牙根面龋和窝沟龋都有一定效果，DIAGNOdent和ECM的测量结果显示这种好转来源于牙的再矿化。但目前的研究报告尚不多，除此之外，臭氧的治疗效果研究还应该考虑：

臭氧治疗的最佳浓度

是否需要多次应用

作用的持续时间

臭氧能深入的龋损深度

是否有其他的副作用等等。

责任编辑：文云芸