n 关键词：人工龋；氟；微量元素；脱钙　　摘要　目的:比较6种含氟及微量元素的防龋制剂对牙釉质脱钙的影响，观察早期龋形成过程中釉质脱钙与时间的关系。方法:选择牛牙84颗，分为7组。实验区分别用含有相等氟离子的氟化锶、氟化亚锡、氟钼酸铵、氟化锌、氟化镧、氟化钠及去离子水处理，所有样本浸泡于乳酸凝胶中形成人工釉质龋。经过对不同浸泡时间酸蚀凝胶中钙含量的观测，各组样本48小时以前釉质脱钙量随时间的变化有所不同，48小时以后酸蚀凝胶中钙含量趋于恒定。结果:氟化亚锡抑制釉质脱钙的能力最强，氟化钠最弱。结论:酸蚀凝胶法形成人工龋时间约在48小时左右；含氟及微量元素的防龋制剂能有效地抑制釉质脱钙，其机理可能是氟与微量元素的协同作用。 Study of Effects of Six caries-preventive 　　Agents on Enamel Decalcification Wu Hongkun, Zhou Xuedong, Zhang Ping, et al 　　College of Stomatology, West China University of Medical Sciences 　　Li Xiaohong, Zhang Wanli 　　Department of Oral Medicine, the First Affiliated Hospital, Kunming Medical College 　　Abstract　Objective:To compare the influence of 6 caries-preventive agents containing fluoride and trace element on dental enamel decalcification and observe the relationship between enamel decalcification and time of early carious lesions.Methods: 84 bovine teeth were selected and divided into 7 groups.Experimental groups were treated with SrF, SnF2,(NH4)2 MoO2F4,ZnF, LaF and NaF with the same ［F-］concentration and deionised water respectively, then all the specimens formed artificial carious lesion in lactic acid gel.Results: The ［Ca2+］ concentration of lactic acid gel showed a variety of enamel decalcification among specimens treated with fluoride agents after 48 hours, on the other hand, all the specimens presented a platform of enamel decalcification after 48 hours. SnF2 demonstrated the strongest inhibition on enamel decalcification, meanwhile, NaF has the minimum influence on it.Conclusion: The time of forming artificial carious lesion with acid etch is about 48 hours,moreover, caries-preventive agents containing fluoride and trace element are effectively able to inhibit enamel decalcification, and the potential mechanism is the interaction of fluoride and trace element. 　　Key words:　fluorid　　trace element　　decalcification　　artificial carious lesion 　　氟具有抑制早期龋脱矿的作用已被公认，目前有学者认为锡、钼、镧、锶、锌等微量元素可以通过多种途径使再矿化作用大于脱矿作用，氟与微量元素的共同作用能有效地抑制釉质脱钙，减少氟的含量，同时能促进再矿化［1］。然而未见文献报道哪一种含氟制剂对抑制牙釉质脱钙的作用效果更佳。本研究比较6种含氟制剂对牙釉质脱钙的影响，同时观察早期龋形成过程中釉质脱钙与时间的关系，为选出较理想的抑制早期龋脱矿的含氟制剂提供实验室依据。　　1　材料和方法　　1.1　牙标本的选择、制备　　取新鲜拔除的牛下颌切牙，去除牙根部软组织，用无氟石英砂磨去釉质表面菌斑及色素，用高速涡轮机裂钻分离冠根，清水冲洗干净，超声洗涤，去离子水冲洗，干燥。体视显微镜下观察（×10）无裂痕缺隙者置于去离子水中，-20℃冰箱中保存备用。　　选牙冠唇面颈1/3处，直径0.7 mm的开窗区，其余部分用无色指甲油涂布。随机将84颗牙冠分为7组，每组12颗，每组开窗面的牙釉质首先用75％乙醇消毒，自然干燥。然后开窗区分别用含有等同氟离子浓度的氟化锶、氟化亚锡、氟钼酸铵、氟化镧、氟化钠、氟化锌、双蒸水涂擦开窗面，每次2分，共涂3次。用大量去离子水冲洗干净，紫外灯下照1小时消毒备用。　　1.2　人工釉质龋的形成　　本实验采用酸蚀凝胶法形成人工龋模型。酸蚀凝胶配方:乳酸（0.1 mol/L)、琼脂（l％）、制霉菌素(适量）,pH 4。将己处理过的7组样本分别置于8 ml的酸蚀凝胶中浸泡，置37℃水浴,分别观测1、3、10、24、48、72、125、196小时酸蚀凝胶中的釉质钙溶量。　　1.3　钙溶量测定　　采用美国EL312e自动微板读数仪，波长为630 nm处测定酸蚀凝胶中钙的光密度值（OD值）。同期作标准曲线(图1)。 图1　钙离子标准曲线　　2　结　　果　　2.1　经酸蚀凝胶浸泡的牙釉质开窗区，肉眼可见白垩色区域，有典型的釉质人工龋形成。经防龋制剂处理的各组样本随时间的变化牙釉质脱钙量有所不同。经过双因素方差分析（two-way ANOVA）可得出，1、3、10、24、48小时釉质脱钙有差异（P＜0.0001）,而48小时以后，观察到192小时，釉质脱钙无差异（表1,图2)。表1　不同时间酸蚀凝胶中的釉质钙含量（n＝84） 时间（h) 釉质钙容量(OD值)* 　　(±s) 1 0．3010±0．1555 3 0．4485±0．1395 10 0．5220±0．1404 24 1．0120±0．1057 48 1．3333±0．0450 72 1．1654±0．0232 125 1．1885±0．0156 192 1．1698±0．0470 　　*　所有标本在每一测定时间的钙溶量总和 图2　时间与牙釉质脱钙的关系　　(48小时以后矿物质含量基本一致，曲线趋于平台) 　　1　氟化锶,　2　氟化亚锡，　3　氟化锌,　4　氟化镧，　　6　氟钼酸铵，　8　氟化钠,　9　双蒸水　　2.2　6种防龋制剂对釉质脱钙的影响　　分别取各组不同时间的酸蚀凝胶测量釉质脱钙量，采用双因素方差分析（two-way ANOVA），氟化亚锡、氟化锶、氟化锌、氟化镧、氟钼酸铵、氟化钠均有抑制牙釉质脱钙的能力（P＜0.0001），与对照组相比有统计学意义。防龋制剂之间进行两两比较,氟化亚锡具有最强的抑制脱钙的能力,而氟化钠抑制脱钙的能力最弱；氟化锶、氟化锌、氟化镧、氟钼酸铵之间抑制脱钙的能力无统计学意义（表2)。表2　各实验组釉质钙溶量的比较 组别 n 釉质钙容量(OD值)* 　　(±s) 氟化锶 12 0．8506±0．3886 氟化亚锡 12 0．8018±0．4093 氟化锌 12 0．8571±0．3832 氟化镧 12 0．8557±0．3819 氟钼酸铵 12 0．8625±0．3711 氟化钠 12 0．8999±0．3450 双蒸水 12 0．9322±0．2808 　　*　每一实验组在所有测定时间的钙溶量总和的OD值　　3　讨　　论　　本研究结果显示随着时间的延长釉质脱钙随之增加，但48小时以后，釉质脱钙趋于恒定。6种含氟制剂处理的牙釉质均有抑制脱钙的能力，但作用能力有所不同，不同制剂处理牙釉质后牙釉质脱钙量随时间变化的曲线外形相似。Gao等［2］通过扫描电镜证实：在人工龋形成的50小时内釉质表层的矿物质含量持续丧失，到50小时以后，由于早期龋“完整”表层的形成，表层的矿物质含量仅发生很小的变化，趋于不变。本实验结果与之一致。相对完整的釉质表面层的出现，不仅仅是由于釉质表层的自身保护作用，还包含了龋损形成期间所发生的脱矿动力学过程。由于双水磷酸二钙（DCPD）从表层下脱矿区溶解并沉积到表层，导致表层再生［3］。本研究证实了具有相同氟离子浓度的抗龋制剂短时间处理牙釉质后，具有抑制釉质脱钙的能力，这与以往文献报道一致。氟既可以减少釉质脱矿率同时也可 以增加其再矿化能力。采用标准氟5.26×10-2 mol/L(1000 ppm)的短时间处理牙面后（刷牙），口腔可呈现持续性的低氟状态18小时，此时唾液中残留的氟量为7.37×10-7 mol/L(0.014 ppm),此浓度具有抑制釉质脱矿的能力［4］。其原因主要是由于氟与釉质作用除形成少量氟磷灰石外，主要产物是CaF2。本研究亦采用标准氟离子浓度5.26×10-2 mol/L。Jeanson等认为CaF2为釉质抗酸能力提供了相对不易透析的屏障，从而降低了釉质在弱酸中的溶解度。　　本实验中含有微量元素的氟制剂具有较强抑制釉质脱钙的能力，此作用不仅仅归结于氟离子，还有赖于微量元素的作用。6种含氟制剂中氟化钠抑制釉质脱钙的能力最弱，氟化亚锡抑制作用最强,而氟化锶、氟化锌、氟化镧、氟钼酸铵抑制釉质脱钙的能力界于氟化钠和氟化亚锡之间，但无统计学差异。因此作者认为含氟制剂抑制釉质脱钙的能力不仅是氟离子的作用，而且还有其它元素的协同参与。锶、锌、钼、镧、锡等微量元素有一定的抗龋作用［5］。锶可以增强牙釉质的抗酸力，锶和氟共同存在时，有协同降低磷灰石溶解的效力，从而增强牙釉质的抗龋力［1］;锶有减少牙釉质中碳酸磷灰石量，增加牙齿内磷灰石晶体体积,同时具有阻止釉质中钙、磷的溶解和释出的作用，从而增加牙釉质的抗龋力［6］。另有文献报道锌不仅能抑制菌斑生长，同时能抑制牙菌斑产酸，但未见报道锌对釉质的直接作用。本实验显示：锌、氟的共同作用能增加釉质抵抗酸的能力，并且优于单纯用氟,但其机理有待进一步研究。钼可以促进釉质对氟的摄取，从而形成氟化钙、氟磷灰石，增强釉质抗酸及再矿化能力，氟钼酸铵溶液中离解出的MoO2-4可置换羟基磷灰石中PO3-4的位置形成难溶的盐类，增强了晶体的稳定性，降低酸对牙釉质的溶解能力［7］。镧能增强牙齿的抗酸能力。以往研究表明La3+能与牙面的Ca2+发生离子交换反应而形成一种较羟磷灰石更稳定的抗酸性磷酸镧保护层［8］。氟化亚锡可以通过形成锡-磷-氟复合物，降低釉质表面的自由能，增加釉质的稳定性，而增加釉质的抗酸能力［9］。　　参考文献　　1　Antilla A．Proton-induced X-ray emission analysis of Zn，Sr and Pb in human deciduous tooth enamel and its relationship to dental caries scores．Arch Oral Biol，1986,31(2):723～726 　　2　Anderson P, Davis GR. Monitoring demineralization and remineralization of enamel in vitro using an infrared reflectance meter. Caries Res, 1996,30(3):394～399 　　3　樊明文主编.口腔生物学.北京:人民卫生出版社,1996:192～196 　　4　Page DJ. A Study of the effect of fluoride delivered from solution and dentifrices on enamel demineralization. Caries Res, 1993,26(8):396～402 　　5　岳松龄主编.现代龋病学.北京:北京医科大学·中国协和医科大学出版社, 1993:360～365 　　6　Vrbic V, Stupar J. Dental caries and the concentration of aluminum and strontium in enamel. Caries Res,1980,14(6):141～146 　　7　厚继续.防龋药物氟化钼酸铵.国外医学口腔医学分册, 1992,19(5):261～264 　　8　Collys K, Slop D, Langhe LDE, et al. A comparison of the influence of lanthanum and fluoride on demineralization and remineralization of bovine enamel in vitro. J Dent Res,1990,69(2):458～461 　　9　Tianoff N, John M. The effect of NaF and SnF2 mouthrinses on bacterical colonization of tooth enamel: TEM and SEM studies. Caries Res,1976,10(3):415～426