2.1 PCR的敏感性
本文建立的PCR至少可检出0.1 ng DNA中的Pg 16SrDNA和Aa 16SrDNA,fimA、prtC和lktA的PCR检测敏感性均为0.1 ng DNA,fap则为100 ng DNA。上述基因PCR扩增结果见图1和图2。
图1 Pg 16SrDNA、prtC和fimA基因
PCR检测结果注:泳道1和2:16SrDNA阴性对照和阳性对照,泳道3:龈下菌斑标本的16SrDNA扩增结果,泳道5和6:prtC阴性对照和阳性对照,泳道7:龈下菌斑标本的prtC扩增结果,泳道9:Marker,泳道10和11:fimA阴性对照和阳性对照,泳道12:龈下菌斑标本的fimA扩增结果,泳道4、8、13:空白对照。
图2 Aa 16SrDNA、lktA和fap基因P
CR检测结果注:泳道1和2:16SrDNA阴性对照和阳性对照,泳道3:龈下菌斑标本的16SrDNA扩增结果,泳道5和6:lktA阴性对照和阳性对照,泳道7:龈下菌斑标本的lktA扩增结果,泳道9:Marker,泳道10和11:fap阴性对照和阳性对照,泳道12:龈下菌斑标本的fap扩增结果,泳道4、8、13:空白对照。
2.2 PCR的阳性率
127例患牙的龈下菌斑标本中,Pg 16SrDNA、prtC和fimA的阳性率分别为90.6%、81.9%和78.0%,Aa 16SrDNA、lktA和fap的阳性率分别为92.1%、81.1%和29.9%。
2.3 Pg和Aa各基因PCR检测阳性率与临床症状之间的关系
2.3.1 与牙周袋深度的关系
fimA阳性率与牙周袋深度有关(χ2=10.952,P=0.004)。当牙周袋深度大于7 mm时,fimA阳性率最高(P<0.05)(见表1)。未发现其余各基因阳性率与牙周袋深度间有何关系。
表1 牙周袋深度与fimA阳性率间的关系
牙周袋深度(mm)样本数
fimA (-)(+)阳性率
333132060.6%
4~660134778.3%
>73423294.1%
合计127289978.0%
2.3.2 与GI的关系
PCR结果发现Pg prtC检出率与GI有关(χ2=6.686,P=0.035),当GI=1时,prtC阳性率高于GI=2时的prtC阳性率(χ2=6.630,P=0.010)。GI不同时fimA的检出率存在差异(χ2=11.635,P=0.003),GI=2时,fimA阳性率低于其余2组(P<0.01)。GI不同时fap的检出率也存在差异(χ2=12.143,P=0.002),GI=1时,fap阳性率高于其余2组(P<0.01)(见表2)。未发现其余基因阳性率与GI有何关系。
表2 GI与Pg prtC、fimA和Aa fap基因的PCR阳性率间的关系
GI样本数
prtC(-)(+)阳性率
fimA(-)(+)阳性率
fap(-)(+)阳性率
13113096.8%32890.6%141754.8%
255144174.5%203563.6%431221.8%
34183380.5%53687.8%32921.9%
合计1272310481.9%289978.0%893829.9%
2.3.3 与PLI的关系
fap阳性率与PLI有关(χ2=12.595,P=0.002)。PLI=1时,fap阳性率最高(P<0.05)(见表3)。未发现其余各基因阳性率与PLI间有何关系。
表3 PLI与fap阳性率间的关系
PLI样本数
fap(-)(+)阳性率
138191950.0%
246331328.3%
34337614.0%
合计127893829.9%
2.3.4 其他
未发现各基因检出与其他临床症状(牙槽骨吸收程度、松动度)有何关联。