摘要 目的:研究从SPF大鼠口腔中分离的内源性血链球菌是否可以阻止或减少牙周可疑致病菌牙龈卟啉单胞菌P.g381在口腔的生长和定植。方法:选用10只SPF大鼠分作2组,强力霉素口腔清扫7 d以后分别接种内源性血链球菌和P.g381,二者均获稳定定植。接着选用30只SPF大鼠经强力霉素口腔清扫后随机分作A～F6组,其中A、B两组先接种P.g381 5 d,C、E两组先接种血链球菌5 d;然后A组再接种血链球菌5 d,C、D两组接种P.g381 5 d,F组作为阴性对照。接种完成后分别于12 h、24 h、36 h、7 d和14 d采集龈下菌斑标本检测内源性血链球菌和P.g381定植水平。结果:先定植和重复感染的内源性血链球菌在较短的时间内(36 h内)可以减少P
.g381的定植水平。这并非是由于24 h或36 h以后血链球菌水平下降所致,因为整个实验中血链球菌始终保持稳定的定植水平。结论:血链球菌不仅要具备定植于口腔的能力,更重要的是能在活体有效地发挥其拮抗作用,才能作为牙周病的效应菌。
微生物学调查结果表明健康牙周龈下微生物以革兰氏性球菌和杆菌为主,而在牙周病变部位则聚集了较多的革兰氏阴性致病菌［1］。定居于牙周健康部位的某些细菌具有抑制牙周可疑致病菌定植和生长的能力,它们是维护牙周健康的有益菌［2～4］。利用这些有益菌的细菌干扰作用,在患者口腔中建立起有益于牙周健康的生理菌群,可望达到生态防治牙周病的目的。
血链球菌是重要的牙周有益菌,它在牙周健康部位检出率较高而在牙周病变部位检出率较低甚至缺乏［2,5］。体外实验证明它对大多数牙周可疑致病菌如牙龈卟啉单胞菌、伴放线放线杆菌等都具有抑制作用［6,7］。如果体内实验证实血链球菌对致病菌具有拮抗作用,就可以利用它来控制龈下微生物组成,达到防治牙周病的目的。本实验研究血链球菌和牙龈卟啉单胞菌在SPF大鼠口腔中的相互作用,为牙周病的生态防治提供依据。
1 材料和方法
1.1 血链球菌和牙龈卟啉菌在SPF大鼠口腔的定植
选用10只5周龄Wistar品系SPF大鼠,随机分为A、B两组。首先用强力霉素灌胃,每天每只大鼠给药200 mg,连续给药7 d;然后在A组大鼠口腔接种1.0×109 CFU/ml(CFU,colony-forming unit 集落形成单位)浓度的内源性血链球菌,每只大鼠每天给予1 ml,连续给菌5 d;B组大鼠用灌胃针经胃给予同样浓度的牙龈卟啉单胞菌,每只大鼠每天给予1 ml,连续给菌5 d。其中内源性血链球菌为给药前从普通大鼠口腔分离得到,牙龈卟啉单胞菌P.g381由华西医科大学口腔重点实验室提供。在第5天细菌接种完成后的12、24、36 h,7 d以及14 d,对血链球菌和牙龈卟啉单胞菌在各组的定植水平进行定量检测。
1.2 血链球菌和牙龈卟啉单胞菌在S
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