【摘要】 目的：深入研究过度张口引起口面痛的作用机制。方法：观察过度张口动物模型TMJ和咀嚼肌的组织病理改变及SP和PGE2、PGF2α的免疫反应；检测24名健康志愿者过度张口前后口面部的痛阈变化。结果： 过度张口引起了TMJ和咀嚼肌的损伤，损伤局部有SP和PGE2、PGF2α的明显聚积；过度张口后口面部的痛阈明显下降，24-48小时后痛阈基本恢复同前；对过度张口的反应存在个体差异和部位差异。结论：过度张口可损伤TMJ和咀嚼肌，引起口面部疼痛，此过程有内源性致痛物质的参与。 　　许多研究表明，颞下颌关节(temporomandibular joint, TMJ）的过度运动可引起口面部疼痛，其中过度张口被视为重要原因之一。临床上常见大口咬硬物、连续打哈欠、拔阻生牙时间过长、经口全麻插管及经口支气管镜检后，发生口面痛的病例报道[1-3]。但有关过度张口引起口面痛的专门研究报道甚少。本研究一方面对所建立的过度张口动物模型进行TMJ和咀嚼肌的组织病理及组织化学的实验研究；另一方面对健康志愿者过度张口前后口面部的痛阈变化进行观测分析，以期深入研究过度张口引起口面痛的作用机制。 1 材料和方法 1.1 实验动物及动物模型　实验动物为北京农业大学实验动物所提供的实验用小型猪14只，年龄6-8个月，雌雄兼半。用开口器从磨牙区撑开下颌至最大开口位，持续50分钟，每周一次。随机分为3周组（A组）3只，6周组（B组）3只，3周后和6周后分别休息2周组（C、D组）各2只，对照组4只。1.2 标本制备与观察分析1.2.1 组织病理 动物麻醉后分别取下颞肌、嚼肌、翼外肌、翼内肌和TMJ软硬组织，按光镜、扫描电镜和透射电镜常规处理各标本并分别观察之。1.2.2 免疫组化 将关节软组织整体取下，液氮骤冷，-80℃保存。切片前OCT包埋，恒低温切片，厚度均分为14μm（前列腺素E2, PGE2用）和30μm（P物质，SP用）。按ABC法进行免疫组化染色，PGE2抗体为1∶800，SP抗体为1∶600。显色反应终产物为棕黄色。阴性对照组均用Tris缓冲液替代一抗，其余步骤相同。固定封片后光镜观察。1.2.3 放免分析 依次暴露各咀嚼肌，取材前用16％消炎痛液涂浸局部，防止PGE2体外合成。每肌取两块，约6mm3。液氮骤冷，-80℃ 封存。分析前先称重，冰浴下匀浆，按3H- PGE2、PGF2α放免分析法提取标本，按双管法程序进行检测分析[4] 。所用试剂盒由本院生化室提供。用SAS软件进行数据处理。1.3　志愿受测者　身体健康、无口面部不适，口腔颌面常规检查无异常表现者24名，男女性各12名，平均年龄19.5岁。1.4　痛阈测量仪[5]　由北京医科大学口腔医学院和国防科工委第一计量测试中心联合研制的数显触痛仪，量程范围为0-10kg, 分辩率为0.1kg，量程内的非线性误差不超过0.02％。1.5　痛阈测量方法[5，6]　受测者取正坐位，向其讲明测试方法，嘱其感到触压力造成疼痛时按动开关。测试部位为双侧颞肌前部、颞肌后部、关节前部、关节后部、嚼肌中部。测试部位的顺序随机决定，测试过程均由一名医师实施。以触痛仪触头对准上述测试部位徐徐加压，当受测者认为已造成痛觉时即按动开关，仪器发出蜂鸣声提示医生停止加压，同时仪器数显表上的压力数值“冻结”，以便记录此阈值。测试时间分为过度张口前、过度张口后即刻、过度张口后24小时、过度张口后48小时，均为上述同一部位前后自身对照。过度张口为嘱受测者最大限度地咬住一大苹果，并以手扶之，维持5分钟后再将苹果吃下。测试结果用SAS软件进行统计处理。 2 结果 2.1 组织病理学观察　髁状突表面胶元纤维暴露、松解、断裂，软骨层变薄；关节盘前带及前伸部、后带与双板区交界处胶元纤维紊乱，毛细血管增生，神经纤维变性，炎细胞浸润；关节囊滑膜细胞轻度增生，线粒体肿胀，溶酶体和微丝增多；咀嚼肌肌原纤维紊乱，糖原增多，线粒体肿胀，出现髓鞘样小体，细胞核染色质凝聚，以翼外肌下头最显著，其次为颞肌，咬肌和翼内肌。去除创伤后TMJ和咀嚼肌均有不同程度的好转，其中咀嚼肌的修复能力较TMJ强，关节滑膜的恢复速度较慢。2.2 免疫组化反应　损伤局部有SP和PGE2的明显聚积。SP以关节盘前伸部、双板区和关节囊中的神经纤维和血管壁的反应最为显著，去除创伤后盘周组织（以前伸部为主）和关节滑膜的阳性反应消退较慢；PGE2主要出现于盘周附着和滑膜皱襞中，以盘周肌肉的反应最为显著。C组、D组的神经和血管的阳性反应接近对照组，肌肉的恢复程度不一，滑膜仍有弱阳性反应。2.3 放免分析（表1）　过度张口各咀嚼肌中PGE2、PGF2α的含量均增高，以翼外肌下头最为显著，其次是颞肌，停止创伤后显著下降；创伤早期以PGE2增高为主，去除创伤后PGF2α相对增高。 表1　咀嚼肌PGE2、PGF2α含量及其比值的放免分析（±sx，pg．mg-1） 本新闻共3页,当前在第1页  1  2  3