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透明质酸和纤维粘合剂抑制皮肤疤痕的研究
作者:佚名 日期:2007年01月23日 来源:不详 浏览:

核心提示:

  摘 要:目的 观察两种浓度透明质酸(hyaluronic acid,HA)(1%HA,1.5×106D,1.4%HA,5×106D)和纤维粘合剂(fibrin sealant,FS)对大鼠切口愈合的影响。方法 16只SD大鼠,背部两侧做四个约1cm切口,分别做空白对照、1%HA、1.4%HA、FS组,术后1天、1周、4周、12周处死动物,取材,HE染色进行成纤维细胞计数,Masson染色进行胶原含量测定,测定伤口愈合强度。结果 1%HA组,1.4%HA组和FS组炎症细胞少,对照组皮肤附属器少,胶原致密成束,间隙小。HA组和FS组表皮与周围基本一致,胶原排列有序,胶原间隙较大。伤口愈合强度各组与对照组没有区别。结论 HA抑制成纤维细胞增生,减少胶原含量抑制疤痕,伤口愈合强度未受


影响,FS通过内源性伤口愈合机制,促进伤口愈合。

  1971年Burrington发现胎儿皮肤组织创面修复后无瘢痕,胎儿皮肤伤后透明质酸(hyaluronic acid,HA)迅速升高并持续一段较长时间,成人皮肤伤后HA一过性升高,3天后测不到HA[1]纤维粘合剂(fibrin sealant,FS)在外科中用于神经吻合术,软组织止血,皮肤移植固定,粘合骨组织等[2]。用于减少伤口疤痕未见报道。

  本实验观察HA和FS抑制皮肤伤口疤痕的作用。

  1 材料和方法

  1.1 实验动物:SD大鼠16只,雄性,180~200g,分笼饲养,编1~16号,分成四组,分别为1日组、1周组、4周组、12周组,每组4只。

  1.2 实验材料:1%HA:分子量1.5×106D,(广州市医药工业研究所生化室提供)。1.4%HA:分子量5×106D(瑞典厄普沙拉药厂)。FS:广州倍特生物技术有限公司生产并提供。每套FS包括主体(内含纤维蛋白原、第Ⅷ因子等成分)催化剂(内含凝血酶等成分)各一瓶(均为粉末状),并附有相应的溶解剂各1.5ml。

  1.3 手术方法:3%戊巴比妥(3mg/kg),肌肉内注射麻醉。SD大鼠的前后背部两侧剪毛,共做四个切口,平行于脊柱,距脊柱1.5cm,前后切口距离3cm,切口长1cm,切开皮肤全层。四个切口按顺序依次做对照组,1%HA组,1.4%HA组和FS组。对照组未处理,直接缝合。1%HA组和1.4%组经注射器注入HA0.05ml于切口内,涂于创面;FS组用注射器注约0.1ml于伤口创面,角针,3-0丝线缝合伤口,分笼饲养,青霉素2万单位肌注,每天1次,共5天。届时按计划处死,原切口取材,行组织学切片观察。

  1.4 检测方法:(1) 成纤维细胞计数(HE染色切片,100倍镜下,1/5测微网格,每4格做一单位,5个既定的框格记录成纤维细胞数)。(2) 选取每张Masson色切片之伤口组织,5个既定设置范围的框格(40倍镜下)记录框格内胶原纤维的含量计数[3]。(Kontron IBAS 2.0系统,ZEISS Axiotron显微镜,JVC ky-F 30B 3-CCD录入器)。伤口抗位强度的比较:将四组伤口术后不同时间取样,用拉力计(XXL-50型拉力试验机,广东省钢铁研究所物理测试室)持续牵引直到断裂,此时记录拉力表示伤口的愈合强度。

  2 结果

  2.1 大体观察:1日组:部分伤口表面渗出,有血迹,HA组表面有HA,FS组伤口较清洁干净。1周组,4周组,12周组:伤口愈合良好。

  2.2 光镜观察:

  (1) 1日组 对照组:表面见炎性渗出物,表皮不连续,真皮切口未愈合,切口两侧见较多炎症细胞浸注。1%HA组:表面见炎性渗出物和HA,表皮已覆盖切口,表皮呈多层细胞,真皮切口两侧炎性细胞浸润较少,真皮内裂隙较对照组小。1.4%HA组:表面见HA和炎性渗出物,表皮沿渗出物爬行,但未完全愈合,真皮内炎性细胞浸润较少,裂隙较对照组小。FS组:表面渗出物较少,表皮已完全愈合,见棘细胞增生,真皮切口两侧已粘连,切口两侧炎性细胞浸润较少。

  (2) 1周组 对照组:表皮已愈合,表皮增生明显,棘细胞增生明显,细胞肥大,表皮栓嵌入真皮层内。真皮内成纤维细胞及血管内皮细胞明显增生,较多炎性细胞浸润,见新形成胶原纤维。1%HA组:表皮已愈合,部分表皮向真皮内凹陷,部分表皮棘细胞见增生,但增生不如对照组活跃。真皮内切口外见新形成胶原纤维,排列较有规则,胶原较细小,成纤维细胞较少。1.4%HA组:类似1%HA组。FS组:表皮已愈合,部分表皮见增生,部分切口表皮有凹陷,真皮层内切口两侧较多成纤维细胞增生,胶原纤维平行于表皮。

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